菌种传代与保藏是生物实验中的基本操作。首先，需要了解“传代”的概念，它指的是将菌种接种至新鲜培养基上，每萌发一次即视为一次传代。从原始菌种冻干粉起，传代次数不得超过5代。标准菌的复苏即为第一代，复壮则为第二代。传至第三代时，需从冻存管中自然解冻，转接斜面菌种作为工作用菌种，此时工作用菌种即为第三代。传代操作步骤如下：从冰箱取出菌种斜面后，需在室温下放置约30分钟。将新鲜配制的培养基菌种保藏管放置于洁净工作台上，开启紫外灯照射一小时后关闭。点燃酒精灯，左手握住菌种斜面，右手拿接种棒后端烧红约30秒后，将接种棒金属部分在火焰上烧灼，往返三次。然后用无名指、小指及掌部夹住管塞，左手旋转管口烧灼，右手轻拔管塞，将接种环伸入管内，先在近壁的琼脂斜面上靠一下，稍冷后再至菌苔上刮取少量菌苔，取出接种棒，将菌种管口移至火焰上方，塞上管塞，最后将菌种管放下。接着，取营养琼脂斜面或改良马丁琼脂斜面，按照上述步骤打开管塞，将接种环伸入管内至琼脂斜面底部，划直线及连续曲线至斜面顶端，使细菌接种在斜面上。取出接种环，在火焰上方盖上培养基管塞，然后将接种过细菌的接种环在火焰上烧灼灭菌。将已接种好的细菌管置于36℃±1℃细菌培养箱培养18~24小时，真菌管置于28℃±2℃真菌培养箱最多培养7天。在传代过程中，当工作用菌种代数小于5时，可以直接使用上一代工作用菌种转接下一代工作用菌种，如（W3）直接转接为（W4）。按照上述程序操作，直至（W4）转为（W5）为止，需重新接种，并及时销毁旧的工作菌种。此外，菌种斜面的培养、保藏条件及时间需严格控制，菌种斜面需每周检查状态是否正常。
